Предложен метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), позволяющий одновременно определять кортизол, кортизон и вторичные стероиды в сыворотке для последующего анализа традиционной обращенно-фазной ВЭЖХ с УФ-детекцией при 240 нм. Жидко-жидкостная экстракция (LLE) из щелочной среды в диэтиловый эфир. Разделение на колонке размером 150 × 4,6 мм ODS – 3,5 мкм в изократическом режиме. Элюент ацетонитрил – 0,02 М фосфатный буфер рН 8,0 – изопропанол (40:60:1). С помощью предложенного метода удалось разделить кортизол, кортизон, дексаметазон, кортикостерон, 11-дезоксикортизол, тестостерон, дезоксикортикостерон, 17α-метилтестостерон, андростендион и 17α-гидроксипрогестерон за 20 мин. Простота, воспроизводимость и достаточные селективность и чувствительность метода позволяют его использовать в клинической практике для одновременной диагностики врожденных гиперплазий надпочечников 1-го и 2-го типов.