АВТОМАТИЗИРОВАННЫЙ АНАЛИЗ АНТИНУКЛЕАРНЫХ АНТИТЕЛ МЕТОДОМ НЕПРЯМОЙ РЕАКЦИИ ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНЦИИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ HEP-2-КЛЕТОК

Выявление антинуклеарных антител (АНА) в сыворотке крови на основе непрямой реакции иммунофлюоресценции (НРИФ) с использованием клеток линии HEp-2 (НРИФ-HEp-2) – золотой стандарт и ключевой скрининговый метод лабораторной диагностики аутоиммунных ревматических заболеваний (РЗ). Автоматизированные системы интерпретации образцов флюоресценции способствуют стандартизации и повышению эффективности определения содержания АНА методом НРИФ-HEp-2. Цель – сравнительный анализ автоматизированной и визуальной интерпретации результатов НРИФ-HEp-2 при определении содержания АНА у пациентов с РЗ. Уровень АНА в сыворотках у 1178 больных с РЗ определяли методом НРИФ-HEp-2. Результаты НРИФ-HEp-2 оценивали путем визуальной микроскопии и с использованием автоматизированной платформы AKLIDES. Степень согласованности позитивных/негативных результатов обнаружения (κ=0,5), типов (κ = 0,7) и титров/интенсивности свечения (κ=0,45) АНА при автоматизированной и традиционной интерпретации НРИФ-HEp-2 являлась хорошей. Несовпадение позитивных/негативных результатов исследования содержания АНА по данным автоматизированного и визуального методов оценки НРИФ-HEp-2 отметили у 18,5% пациентов. Автоматизированным методом наиболее часто определяли гомогенное (37,6%) и крапчатое (32,3%) свечение ядра; у 21,4% больных тип свечения не дифференцировался. Визуальным методом в сыворотках у большинства (72,8%) пациентов выявляли смешанный тип свечения. Смешанное свечение распознавалось системой AKLIDES как гомогенное (40,5%), крапчатое (32,7%), нуклеолярное (2,4%), центромерное (0,9%), недифференцированное (23,5%). При визуальном исследовании образцов флюоресценции с недифференцированным типом свечения у 79,8% больных идентифицировали смешанное свечение, у 5,9% – гомогенное, у 14,3% – крапчатое. Титры АНА < 1:160 ассоциировались с интенсивностью свечения 0/±; 1:160 – 0, ±, +, ++; 1:320 – +, ++; 1:640 – ++, +++; ≥ 1:1280 – +++, ++++. В рутинной практике автоматизированная система AKLIDES позволяет идентифицировать позитивные/негативные результаты определения содержания АНА сопоставимо с классическим визуальным методом интерпретации НРИФ- HEp-2 и прогнозировать максимальный конечный титр АНА в сыворотках у больных с РЗ по интенсивности флюоресценции. Для подтверждения результатов автоматизированной оценки типов ядерного свечения и уточнения титров АНА рекомендуется дополнительное экспертное визуальное исследование позитивных образцов флюоресценции.

• Новиков А.А.
• Баранов А.А.
• Александрова Е.Н.
• Насонов Е.Л.
• Абайтова Н.Е.
• Верижникова Ж.Г.
• Лапкина Н.А.
• Роггенбук Д.

• Искусство. Декоративно-прикладное искусство. Фотография. Музыка. Игры. Спорт

• Естественные науки
• Науки о человеке