ОПРЕДЕЛЕНИЕ МЕМБРАННОГО ПОТЕНЦИАЛА МИТОХОНДРИЙ В ЛЕЙКОЦИТАРНОЙ ВЗВЕСИ МЕТОДОМ ФЛЮОРЕСЦЕНТНОЙ СПЕКТРОСКОПИИ
Описан метод определения мембранного потенциала митохондрий в изолированной лейкоцитарной взвеси с использованием чувствительного флюоресцентного катионактивного красителя 5,5',6,6'-тетрахлоро-1,1',3,3'-йодид тетраэтилбензимидазолилкарбоцианина (JC-1) и спектрофотометрии. JC-1-мономер быстро проникает через митохондриальную мембрану живой клетки, в результате чего внутри митохондрий формируются JC-1-агрегаты, характеризующиеся красным спектральным свечением (=585 нм). При деполяризации митохондриальной мембраны, являющейся ранним признаком апоптоза, JC-1 не накапливается внутри митохондрий и находится в цитоплазме в виде мономерной формы, которая характеризуется зеленым спектральным свечением (=510 нм). Предложенная методика позволяет оценить функциональное состояние клеток организма и исследовать механизмы регуляции энергетического обмена путем определения мембранного потенциала митохондрий.
Авторы
Тэги
Тематические рубрики
Предметные рубрики
В этом же номере:
Резюме по документу**
258
Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2014, Том 157, 2
ОПРЕДЕЛЕНИЕ МЕМБРАННОГО ПОТЕНЦИАЛА
МИТОХОНДРИЙ В ЛЕЙКОЦИТАРНОЙ ВЗВЕСИ
МЕТОДОМ ФЛЮОРЕСЦЕНТНОЙ СПЕКТРОСКОПИИ <...> Е.Г.Лобанова, Е.В.Кондратьева
Владивостокский филиал ФГБУ Дальневосточного научного центра физиологии и па
тологии дыхания СО РАМН — НИИ медицинской климатологии и восстановитель
ного лечения, Владивосток
Описан метод определения мембранного потенциала митохондрий в изолированной
лейкоцитарной взвеси с использованием чувствительного флюоресцентного катион
активного красителя 5,5',6,6'тетрахлоро1,1',3,3'йодид тетраэтилбензимидазолил
карбоцианина (JC1) и спектрофотометрии. <...> JC1мономер быстро проникает через
митохондриальную мембрану живой клетки, в результате чего внутри митохондрий
формируются JC1агрегаты, характеризующиеся красным спектральным свечением
(=585 нм). <...> При деполяризации митохондриальной мембраны, являющейся ранним
признаком апоптоза, JC1 не накапливается внутри митохондрий и находится в цито
плазме в виде мономерной формы, которая характеризуется зеленым спектральным
свечением (=510 нм). <...> Ключевые слова: лейкоцитарная взвесь, мембранный потенциал митохондрий, флюоресцент
ный краситель, спектрофотометрия
Митохондриальный трансмембранный потенциал
(m) — разность электрохимических потенциа
лов между матриксом митохондрий и внутрикле
точной средой, многократно превышает потен
циал плазматической мембраны. <...> Митохондриаль
ный мембранный потенциал часто используют
как маркер митохондриальной активности и жиз
неспособности клеток и как один из критериев,
свидетельствующий об активации апоптоза [9]. <...> На этом
основан принцип определения мембранного по
тенциала в экспериментальных исследованиях и
клинической практике. <...> В ходе традиционных измерений мембранно
го потенциала митохондрий с применением флюо
ресцентных и радиоактивных меток, а также ион
селективных <...>
** - вычисляется автоматически, возможны погрешности
Похожие документы: