ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ УСТАНОВКА ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ОДИНОЧНЫХ ИММОБИЛИЗОВАННЫХ НУКЛЕОСОМ С ПОМОЩЬЮ ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ МИКРОСКОПИИ ПОЛНОГО ВНУТРЕННЕГО ОТРАЖЕНИЯ

нуклеосома хроматин иммобилизация флуоресценция микроскопия одиночная молекула.

ПОЛУЧЕНИЕ И СВОЙСТВА РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ НА ОСНОВЕ ШИРО- КО НЕЙТРАЛИЗУЮЩЕГО АНТИТЕЛА ПРОТИВ ВИРУСА ГРИППА ТИПА А, НОВЫЕ НАХОДКИ ЭНДОФИТНЫХ ГРИБОВ. КОРОТКОЕ СООБЩЕНИЕ, ...

2 МЕТОДЫ УДК 577.214 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ УСТАНОВКА ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ОДИНОЧНЫХ ИММОБИЛИЗОВАННЫХ НУКЛЕОСОМ С ПОМОЩЬЮ ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ МИКРОСКОПИИ ПОЛНОГО ВНУТРЕННЕГО ОТРАЖЕНИЯ К.С. <...> Феофанов1,2* 1 Кафедра биоинженерии, биологический факультет, Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова; Россия, 119234, г. Москва, Ленинские горы, д. <...> 333 *e-mail: avfeofanov@yandex.ru Создана экспериментальная установка для изучения иммобилизованных молекул и их комплексов in vitro методом флуоресцентной микроскопии с чувствительностью на уровне одиночных флуорофоров. <...> Установка регистрирует флуоресцентные изображения иммобилизованных молекул одновременно в двух спектральных диапазонах, обеспечивая анализ на основе эффекта Фёрстеровского резонансного переноса энергии. <...> Разработан протокол модификации поверхности стекол для иммобилизации нуклеосом через высокоаффинные стрептавидин-биотиновые взаимодействия. <...> Чтобы обеспечить иммобилизацию, один из концов ДНК флуоресцентно-меченых мононуклеосом был биотинилирован. <...> Разработан алгоритм обработки изображений для анализа структурных перестроек в одиночных нуклеосомах. <...> Флуоресцентная микроскопия одиночных иммобилизованных молекул и их комплексов расширяет возможности изучения структурной динамики нуклеосом при транскрипции и взаимодействии с различными ядерными белками. <...> Новые методы доказали свою эффективность при изучении нуклеосом, а также комплексов и процессов с их участием [3–8] и требуют дальнейшего развития. <...> Ранее нами на основе флуоресцентномеченых промотор-содержащих матриц ДНК были получены точно позиционированные мононуклеосомы [6–8], содержащие в нетранскрибируемой цепи ДНК флуорофоры циановый 3 (Cy3) и циановый 5 (Cy5). <...> Было предложено два варианта мечения, при которых после укладки ДНК на октамере гистонов метки оказываются в положениях +35 и +113 [8] или +56 и +135 [6, 7] пар нуклеотидов от входа в нуклеосому на соседних участках ДНК (рис. <...> 1, В), где между ними <...>

• Похожие документы из РУАЭСТ
• |
• Похожие документы из Руконт