ПОЛУЧЕНИЕ И СВОЙСТВА РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ НА ОСНОВЕ ШИРО- КО НЕЙТРАЛИЗУЮЩЕГО АНТИТЕЛА ПРОТИВ ВИРУСА ГРИППА ТИПА А
Для исследования возможности создания на основе широко нейтрализующего антитела против вируса гриппа А различных белковых конструкций для диагностики было проведено конструирование двух рекомбинантных белков — Fab-фрагмента антитела и белка Fab-mCherry, представляющего собой гибрид Fab-фрагмента и флуоресцентного белка mCherry. Оба белка были экспрессированы в клетках Escherichia coli и выделены в функционально активном состоянии из культуральной жидкости. Показано, что Fabфрагмент антитела взаимодействует со всеми одиннадцатью протестированными штаммами подтипов H1N1 и H3N2 вируса гриппа А. При этом наибольшая сила связывания наблюдается в отношении штаммов подтипа H1N1, что соответствует иммунохимическому профилю “родительского антитела”. Сравнение констант диссоциации комплексов Fab-фрагмента антитела и белка Fab-mCherry с вирусными частицами штамма A(H1N1)/Solomon Islands/03/06 показало, что присоединение белка mCherry не влияет на антиген-связывающие свойства Fab-фрагмента антитела.
Авторы
Тэги
Тематические рубрики
Предметные рубрики
В этом же номере:
Резюме по документу**
* e-mail: ta12345@list.ru
Для исследования возможности создания на основе широко нейтрализующего антитела
против вируса гриппа А различных белковых конструкций для диагностики было
проведено конструирование двух рекомбинантных белков — Fab-фрагмента антитела и
белка Fab-mCherry, представляющего собой гибрид Fab-фрагмента и флуоресцентного
белка mCherry. <...> Показано, что Fabфрагмент
антитела взаимодействует со всеми одиннадцатью протестированными штаммами
подтипов H1N1 и H3N2 вируса гриппа А. <...> При этом наибольшая сила связывания
наблюдается в отношении штаммов подтипа H1N1, что соответствует иммунохимическому
профилю “родительского антитела”. <...> Сравнение констант диссоциации комплексов
Fab-фрагмента антитела и белка Fab-mCherry с вирусными частицами штамма
A(H1N1)/Solomon Islands/03/06 показало, что присоединение белка mCherry не влияет
на антиген-связывающие свойства Fab-фрагмента антитела. <...> Причиной
такой высокой вирулентности вируса гриппа А (ВГА)
является изменчивость поверхностных антигенов
вирусного капсида — гемагглютинина и нейраминидазы. <...> Получение
иммунной сыворотки, обладающей
широкой специфичностью в отношении различных
подтипов ВГА, в течение многих лет является одной
из наиболее приоритетных задач современной
фармакологии. <...> При этом в ряде случаев были описаны
успешные примеры получения антител, гетероспецифичных
в отношении некоторых из известных
на тот момент 16 подтипов [2], однако до
недавнего времени не удавалось получить антитело,
обладающее специфичностью в отношении всех
подтипов ВГА. <...> Значительный прорыв в данной
области был достигнут в результате предпринятого
масштабного скрининга более 100 тыс. отдельных
культивированных антителопродуцирующих В-клеток
нескольких доноров, у которых наблюдали значительную
гетеротипичность иммунного ответа
в отношении ряда подтипов ВГА [3]. <...> В результате
было найдено уникальное нейтрализующее антитело
FI6, обладающее способностью связывать рекомбинантные
и природные гемагглютинины <...>
** - вычисляется автоматически, возможны погрешности
Похожие документы: