МОЛЕКУЛЯРНАЯ ДИАГНОСТИКА ИНФЕКЦИЙ Y-ВИРУСОМ И ВИРУСОМ СКРУЧИВАНИЯ ЛИСТЬЕВ КАРТОФЕЛЯ МЕТОДОМ ИММУНОХРОМАТОГРАФИИ
Для молекулярной диагностики инфекций картофеля Y-вирусом и вирусом скручивания листьев картофеля (ВСЛК) разработаны иммунохроматографические тест-системы. Чтобы размножить антиген — капсидный белок труднодоступного флоэмно-ограниченного ВСЛК, был создан бинарный вектор, содержащий кДНК рекомбинантной РНК тобамовируса, в которой ген капсидного белка был заменен на ген белка оболочки ВСЛК. Рекомбинантная тобамовирусная РНК упаковывалась белком оболочки ВСЛК в сферические вирусные частицы. Химерный вирус был инфекционен, а выход его и белка оболочки ВСЛК при выделении был в 800 раз выше, чем у дикого типа. К химерному вирусу были получены антитела для лабораторного и полевого анализа инфекции картофеля. На основании опыта разработки и применения диагностических тест-систем предлагается тактика рациональной массовой лабораторной и практической диагностики вирусных заболеваний организмов на молекулярном уровне.
Авторы
Тэги
Тематические рубрики
Предметные рубрики
В этом же номере:
Резюме по документу**
46
ВИРУСОЛОГИЯ
УДК 577.175.1
МОЛЕКУЛЯРНАЯ ДИАГНОСТИКА ИНФЕКЦИЙ Y-ВИРУСОМ И ВИРУСОМ
СКРУЧИВАНИЯ ЛИСТЬЕВ КАРТОФЕЛЯ МЕТОДОМ
ИММУНОХРОМАТОГРАФИИ
О.А. <...> Дрыгин2,*
1 Кафедра вирусологии, биологический факультет, Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова;
Россия, 119234, г. Москва, Ленинские горы, д. <...> * e-mail: drygin@belozersky.msu.ru
Для молекулярной диагностики инфекций картофеля Y-вирусом и вирусом скручивания
листьев картофеля (ВСЛК) разработаны иммунохроматографические тест-системы. <...> Чтобы размножить антиген — капсидный белок труднодоступного флоэмно-ограниченного
ВСЛК, был создан бинарный вектор, содержащий кДНК рекомбинантной РНК тобамовируса,
в которой ген капсидного белка был заменен на ген белка оболочки ВСЛК. <...> Рекомбинантная тобамовирусная РНК упаковывалась белком оболочки ВСЛК в сферические
вирусные частицы. <...> Химерный вирус был инфекционен, а выход его и белка оболочки
ВСЛК при выделении был в 800 раз выше, чем у дикого типа. <...> Ключевые слова: Y-вирус картофеля, вирус скручивания листьев картофеля, химерный
вирус, иммунохроматография, инфекция, молекулярная диагностика. <...> Молекулярная диагностика инфекций является
частным случаем поиска целевой нуклеотидной последовательности
и/или целевого антигена. <...> В лабораторной диагностике фитопатогенов
наиболее часто используются иммуноферментные
и иммунохимические анализы (ИФА, ИХА), иммунохроматографические
тест-системы (ИХТС),
иммуночипы; ДНК(РНК)-зонды, ПЦР и ОТ-ПЦР
(обратная транскрипция-полимеразная цепная реакция),
ДНК(олигонуклеотиды)-чипы. <...> Для достижения
предельной чувствительности диагностического
анализа, например, в технологии ОТ-ПЦР–МГА
(молекулярный-гибридизационный анализ)–ИФА,
системы усиления сигнала комбинируют [2]. <...> В МГУ на кафедре вирусологии биологического
факультета и в НИИ ФХБ имени А.Н. Белозерского
совместно с ВНИИКХ имени А.Г. Лорха
разработано несколько высокоэффективных методов
молекулярной диагностики вирусных и вироидной <...>
** - вычисляется автоматически, возможны погрешности
Похожие документы: