Новые гибридные белки с активностью органофосфатгидролазы и флуоресценцией белка deGFP4
Разработаны новые генетические конструкции, кодирующие синтез гибридных белков, обладающих органофосфатгидролазной активностью и свойствами аналога зеленого флуоресцентного белка с pH-чувствительной флуоресценцией. Установлено, что для получения максимального выхода гибридных белков в растворимой активной форме в клетках Е. coli необходимо 0, 1 мМ индуктора биосинтеза и 10 ч культивирования после индукции синтеза белков. Достигнутый уровень синтеза одного из новых белков в растворимой активной форме оказался в 2-25 раз выше выходов в растворимой форме гибридных белков-аналогов, известных из литературы. Установлено, что органофосфатгидролаза в составе гибридных белков обладает характеристиками (pH-оптимум действия, термостабильность, субстратная специфичность и каталитическая эффективность действия), отличными от соответствующих характеристик, известных для нативного фермента. Показано, что флуоресценция зеленого флуоресцентного белка, находящегося в составе гибридных белков, зависит от pH среды аналогично индивидуальному белку. На примере одного из гибридных белков показана взаимозависимость его флуоресцентных характеристик и ОРН-активности, проявляющейся в реакциях гидролиза фосфорорганических соединений.
Авторы
Тэги
Тематические рубрики
Предметные рубрики
В этом же номере:
Резюме по документу**
Разработаны новые генетические конструкции, кодирующие синтез гибридных белков, обладающих органофосфатгидролазной активностью и свойствами аналога зеленого флуоресцентного белка с pH-чувствительной флуоресценцией. <...> Установлено, что для получения максимального выхода гибридных белков в растворимой активной форме в клетках Е. coli необходимо 0, 1 мМ индуктора биосинтеза и 10 ч культивирования после индукции синтеза белков. <...> Достигнутый уровень синтеза одного из новых белков в растворимой активной форме оказался в 2-25 раз выше выходов в растворимой форме гибридных белков-аналогов, известных из литературы. <...> Установлено, что органофосфатгидролаза в составе гибридных белков обладает характеристиками (pH-оптимум действия, термостабильность, субстратная специфичность и каталитическая эффективность действия), отличными от соответствующих характеристик, известных для нативного фермента. <...> Показано, что флуоресценция зеленого флуоресцентного белка, находящегося в составе гибридных белков, зависит от pH среды аналогично индивидуальному белку. <...> На примере одного из гибридных белков показана взаимозависимость его флуоресцентных характеристик и ОРН-активности, проявляющейся в реакциях гидролиза фосфорорганических соединений. <...> Разработаны новые генетические конструкции, кодирующие синтез гибридных белков, обладающих органофосфатгидролазной активностью и свойствами аналога зеленого флуоресцентного белка с pH-чувствительной флуоресценцией. <...> Установлено, что для получения максимального выхода гибридных белков в растворимой активной форме в клетках Е. coli необходимо 0, 1 мМ индуктора биосинтеза и 10 ч культивирования после индукции синтеза белков. <...> Достигнутый уровень синтеза одного из новых белков в растворимой активной форме оказался в 2-25 раз выше выходов в растворимой форме гибридных белков-аналогов, известных из литературы. <...> Установлено, что органофосфатгидролаза в составе гибридных белков <...>
** - вычисляется автоматически, возможны погрешности
Похожие документы: